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针对上述问题，陆军军医大学张建祥/陈盛团队基于活性氧（ROS）在炎症部位异常升高的病理特征，设计ROS触发完全自毁的两亲性多肽前药，旨在同时实现胃肠保护、黏液高效穿透及炎症位点智能释药，并验证其在溃疡性结肠炎（DSS小鼠）及急性肺损伤（ALI小鼠）模型中的跨器官治疗潜力。该文章于2026年1月14日以《Inflammation-triggered self-immolative conjugates enable oral peptide delivery by overcoming gastrointestinal barriers》为题发表于《Science Advances》（DOI：10.1126/sciadv.aea2989）。

（1）炎症响应性自毁KPV前药（proKPV）的设计、合成与ROS触发释放表征

研究证实proKPV可经一锅法缩合HCCP-PEG-PBE与Boc-KPV制得，核磁与红外确认结构；其两亲性使其在水中自组装为~81 nm近球形胶束（CMC≈49 μg/mL），Zeta电位近中性。H₂O₂（模拟ROS）存在时，PBE苯硼酸酯键氧化断裂暴露羧基，引发环磷腈骨架开环自毁，24 h内几近完全释放游离KPV；而在无H₂O₂或酸性SGF中释放<9%，证实胃肠稳定性。HPLC与质谱验证水解终产物为可排泄小分子（PEG-NH₂、pinacol、KPV等），表明该体系具备"全自毁、低蓄积"的安全优势。

图1. 炎症响应性自毁KPV前药（proKPV）的设计、组装与释放特性。 (A) SIPPC口服递送策略示意图：四组分共轭物自组装为胶束，ROS触发自毁释放活性肽。(B) proKPV在炎症部位ROS触发的水解与自毁级联反应机制。(C) proKPV NPs的TEM形貌（左）与DLS粒径分布（右）。(D)有无H₂O₂条件下proKPV的KPV体外释放曲线。 (E)模拟胃液（SGF）→ 含H₂O₂肠液（SIF）转换过程中的KPV释放行为。(F, G) 游离KPV与proKPV经SGF/SIF孵育后的HPLC残留量对比。(H–J)经SGF/SIF预处理后，游离KPV与proKPV对LPS诱导巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌的抑制效果。

（2）proKPV纳米粒的体外胃肠稳定性、黏液穿透能力及细胞摄取验证

研究证实proKPV NPs在模拟胃液（SGF, pH 1.2）和肠液（SIF, pH 7.4）中2 h后粒径/分子量基本不变，包裹的KPV无显著泄漏，而游离KPV在相同条件下完全降解失活；经SGF/SIF预处理后proKPV仍保留等同未处理组的巨噬细胞TNF-α抑制能力。多粒子示踪显示proKPV NPs在新鲜结肠黏液中扩散系数（D_eff）与均方位移（MSD）显著高于普通聚苯乙烯颗粒，PEG外壳减少黏液嵌顿；Cy5标记证实其可被中性粒细胞及巨噬细胞时间/剂量依赖性内吞，并在炎症细胞中有效抑制PMA诱导的ROS生成及NETosis（中性粒细胞胞外诱捕网形成）。

图2. proKPV对炎症细胞（中性粒细胞与巨噬细胞）的体外调控作用。(A–C) proKPV剂量依赖抑制PMA激活中性粒细胞中MPO、NE及dsDNA（NETs标志）释放；(D) 免疫荧光显示proKPV减少CitH3⁺ NETosis面积；(E, F) proKPV降低中性粒细胞内ROS水平（荧光定量与图像）；(G) Transwell实验证实proKPV抑制中性粒细胞迁移；(H, I) proKPV抑制巨噬细胞PMA诱导的胞内ROS生成；(J) proKPV减少H₂O₂诱导的巨噬细胞凋亡；(K–M) proKPV较游离KPV更强效抑制LPS激活巨噬细胞的TNF-α、IL-1β、IL-6分泌。

（3）proKPV在结肠炎小鼠体内的结肠靶向富集、组织分布及药代动力学评价

研究证实经口给予Cy5-proKPV后，DSS结肠炎小鼠结肠荧光强度是健康小鼠的2.7倍（炎症区上皮屏障受损促进渗透），且比游离Cy5-KPV高3.8倍（AUC₀₋₂₄h），炎症结肠中滞留>24 h。冰冻切片显示proKPV NPs共定位分布于CK18⁺肠上皮细胞、CD68⁺巨噬细胞及Ly6G⁺中性粒细胞。入血后荧光持续至12 h，证明proKPV可跨越完整肠上皮进入体循环，为远端炎症治疗奠基。

图3. proKPV NPs的黏液穿透能力与结肠炎小鼠体内靶向分布。(A) 多粒子示踪显示proKPV NPs在结肠黏液中的运动轨迹（对比PS NPs）；(B) 不同时间尺度下的均方位移（MSD）曲线；(C) proKPV NPs的有效扩散系数（D_eff）显著高于PS NPs；(D) 结肠炎小鼠口服6 h后结肠切片z-stack共聚焦图像：proKPV深达隐窝，游离KPV仅滞留表层；(E) 结肠炎与健康小鼠口服6 h后结肠离体荧光强度对比（左：成像，右：定量）；(F, G) 口服后不同时间点结肠（F）与血液（G）中的荧光动力学；(H) 炎症结肠中proKPV的AUC₀₋₂₄h是游离KPV的3.8倍；(I) 结肠冷冻切片显示proKPV富集于绒毛顶端；(J–L) proKPV分别与肠上皮细胞（CK18⁺）、巨噬细胞（CD68⁺）、中性粒细胞（Ly6G⁺）共定位。

（4）proKPV对DSS诱导急性结肠炎小鼠的治疗效果与免疫调节机制

研究证实proKPV（0.5、2.5 mg/kg/d，灌胃7 d）剂量依赖性地阻止体重下降、降低DAI评分、抑制结肠缩短；2.5 mg/kg组黏膜几近恢复正常，杯状细胞与PAS阳性黏液层重建，紧密连接蛋白Occludin/ZO-1表达回升（FITC-dextran通透实验证实屏障功能恢复）。与游离KPV（10倍剂量无效）及临床阳性药5-ASA（50 mg/kg）相比，proKPV抗炎效果更优——结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO、MDA、ROS显著下降；Ly6G⁺中性粒细胞浸润与CitH3⁺ NETs减少；促M1→M2巨噬细胞极化（CD206↑）及Treg细胞（Foxp3⁺）扩增，实现炎症消退与组织修复协同。主要脏器无毒性征象。

图4. proKPV对DSS诱导急性结肠炎的治疗效果与机制。(A) 体内治疗时间轴；(B–D) 体重变化（B）、DAI评分（C）、结肠长度（D）；(E) 结肠迷你内镜图像：proKPV组溃疡消失、黏膜完整；(F) H&E与PAS染色：proKPV恢复隐窝结构与杯状细胞；(G) 免疫荧光显示proKPV上调紧密连接蛋白CK18、Occludin、ZO-1；(H–M) proKPV显著降低结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO、MDA、ROS水平；(N) proKPV促进M2巨噬细胞（CD206⁺）与Treg细胞（Foxp3⁺）浸润。

（5）proKPV经口服吸收后对急性肺损伤（ALI）小鼠的肺靶向与治疗作用

研究证实口服Cy5-proKPV在LPS诱导ALI小鼠肺组织有显著荧光聚集（峰值4-12 h），而静脉Cy5-KPV迅速清除。proKPV（2.5、10 mg/kg）口服治疗显著降低BALF中性粒细胞计数及肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO、MDA水平，减轻肺泡出血与炎性浸润，效果优于等量游离KPV，证明SIPPC平台可顺利获得"肠吸收-血循环-炎症归巢"途径治疗胃肠道外炎症疾病。

图5. 口服proKPV对急性肺损伤（ALI）小鼠的治疗作用。(A) ALI模型构建与给药时间轴；(B–G) proKPV降低肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6、H₂O₂、MDA、MPO水平；(H, I) BALF中性粒细胞计数显著减少；(J) H&E染色：proKPV减轻肺泡出血与炎性浸润。

（6）SIPPC策略的普适性验证——基于Ac-QAW与IRW多肽的前药构建与疗效

研究证实将另两种抗炎肽Ac-QAW、IRW按相同模块偶联可得proQAW与proIRW NPs（~76-84 nm），同样具ROS响应释放、抑制中性粒细胞ROS/NETosis及迁移能力。在DSS结肠炎模型中，二者（2.5 mg/kg）均显著缓解体重丢失、保存结肠长度、恢复上皮屏障标志蛋白、下调炎症因子与MPO、促进M2巨噬细胞极化，疗效远优于对应游离肽，验证了"SIPPC四组件（PEG + PBE + HCCP + 肽）"设计的广泛适用性。

图6. Ac-QAW与IRW来源SIPPC的设计与体外活性验证。(A) proQAW/proIRW的化学结构；(B, C) proQAW与proIRW NPs的TEM形貌与DLS粒径；(D, E) 两种前药较游离肽更有效抑制中性粒细胞ROS生成；(F) Transwell实验显示两者抑制中性粒细胞迁移；(G, H) 免疫荧光与定量显示两者减少CitH3⁺ NETosis；(I–K) 两种前药降低NETs相关标志物（MPO、NE、dsDNA）释放。

图7.  proQAW与proIRW对DSS结肠炎的治疗效果。(A–D) 体重（A）、DAI（B）、结肠长度（C）、脾/肾指数（D）；(E) H&E染色显示黏膜结构修复；(F) 免疫荧光证实紧密连接蛋白（CK18、Occludin、ZO-1）恢复；(G–J) 结肠组织炎症因子（TNF-α、IL-1β）与氧化应激指标（MPO、MDA）下降；(K, L) 两种前药均促进M2巨噬细胞（CD206⁺）极化。